کلونینگ ژن tnf-α در میکروب اشرشیا کلی

بیوتکنولوژی علم جدیدی نیست. سابقه استفاده از میکروارگانیسم ها برای تولید مواد خوراکی نظیرنان،سرکه، ماست و پنیر به پیش از 8 هزار سال قبل می رسد. آرتریت روماتوئید یکی از شایع ترین بیماری های التهابی و خود ایمنی مزمن است که حدود 3-0.5 درصد مردم جهان به آن مبتلا می باشند. پس از تایید نقش tnf در این التهاب ها و کارایی بالای روش های مسدود کردن tnf در حیوانات مدل با استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال و پروتئین های نوترکیب انجام شد. با توجه به اهمیت این پروتئین بعنوان یکی از اولویت های تحقیقات پزشکی، بیان ژن مربوطه در سلول های باکتریایی ضروری بنظر می رسد. استخراج rna از شخص داوطلب انجام شد سنتز cdna و واکنش زنجیره ای پلیمراس جهت تکثیر اختصاصی ژن tnf انجام شد و در نهایت ژن tnf-α به وکتور ptz57r/t منتقل شد و کلونینگ توسط واکنش زنجیره ای پلیمراس و برش توسط آنزیم های ncoi و xhoi تایید گردید. نتایج نشان می دهد که می توان با کلون نمودن ژن tnf-α در باکتری اشرشیاکلی مقدار پروتئین موردنظر را افزایش داده که در درمان آرتریت روماتوئید مورد استفاده قرار داد.