محبوبترین نویسندگان :
نویسندگان مقالات پربازدید :
فیزیولوژی و فارماکولوژی ایران
جزئیات رویداد
اینستاگرام تی پی بین
همایش ، رویداد ، ژورنال
حوزه های تحت پوشش رویداد

  • طراحی، کلون، بیان و ارزیابی جایگزین های سیستئینی مولکول استرپتوکیناز در اندازه های کامل و کوتاه شده

    نویسندگان :
    کلمات کلیدی :
    جزئیات بیشتر مقاله
    • تاریخ ارائه: 1387/01/01
    • تاریخ انتشار در تی پی بین: 1387/01/01
    • تعداد بازدید: 716
    • تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
    • شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
    مقدمه: ترومبوز یا انسداد عروق خونی توسط لخته، می تواند منجر به سکته قلبی و گاهی اوقات مرگ شود. صرف نظر از رفع انسداد به کمک جراحی، تنها درمان موجود تجویز عوامل ترومبولیتیک بمنظور از بین بردن لخته است. استرپتوکیناز رایج ترین داروی فیبرینولیتیک برای این منظور است، اما با این وجود تجویز آن با مشکلاتی از جمله تحریک سیستم ایمنی، نیمه عمر کوتاه دارو و خونریزی همراه می باشد. پگیلاسیون پروتئین های داروئی با واسطه اسید آمینه سیستئین یک روش نوین کاستن از ایمنی زائی دارو و همچنین افزایش پایداری و نیمه عمر آنها است. هدف نهائی این مطالعه طراحی و ساخت جایگزین های سیستئینی استرپتوکیناز کامل و نیز اشکال کوتاه شده آن، که با داشتن اختصاصیت به فیبرین اثرات هموراژیک کمتری دارند، می باشد.

    روش ها: با استفاده از تکنیک موتاسیون زائی در ناحیه دلخواه به کمک pcr موتانت های ژن های استرپتوکیناز، دارای جایگزینی کدون agc (سرین) با tgc (سیستئین)، که پروتئین های با طول کامل (اسیدهای آمینه 414-1) و کوتاه شده (اسیدهای آمینه 386-60 و 386-143) را کد می کردند ساخته شده و در پلاسمید pet41a کلون شدند .بدنبال القاء باکتری های ترانسفورم شده  e. coliاسترپتوکیناز های نوترکیب بیان شدند و پروتئین های حاصل با انجام وسترن بلات تائید شده، به روش کروماتوگرافی میل ترکیبی تخلیص شده و در نهایت از نظر فعالیت بیولوژیک مورد ارزیابی قرار گرفتند.

    یافته ها: بیان ژن های استرپتوکیناز موتانت بخوبی صورت گرفته و پروتئین های نوترکیب با اندازه های کامل و کوتاه شده بواسطه اتصال به برچسب هیستیدینی ناشی از ناقل ژنی به راحتی تخلیص شدند. علیرغم جایگزینی سرین با سیستئین در جایگاه اسیدآمینه ای 208، پروتئین های نوترکیب جدید همچنان فعالیت بیولوژیک خود را حفظ کردند.

    نتیجه گیری: پروتئین های موتانت تولید شده در این مطالعه امکان انجام فرآیند پگیلاسیون اختصاصی بر روی سیستئین و به این ترتیب ارتقاء فعالیت بالینی پروتئین استرپتوکیناز را فراهم می آورند.

سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :

با انتخاب دکمه ثبت پرسش، موافقت خود را با قوانین انتشار محتوا در وبسایت تی پی بین اعلام می کنم
مقالات جدیدترین رویدادها
مقالات جدیدترین ژورنال ها