اثر فسفوریلاسیون و دفسفوریلاسیون اسید امینه سرین جایگاه 362 بر روند آندوسیتوز کانال پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه

مقدمه: در این مطالعه اثر فسفوریله و دفسفوریله کننده اسید امینه سرین جایگاه 362 برروند آندوسیتوزکانال پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه پس از بیان در غشاء اووسیت بررسی گردیده است.

روش کار: در این مطالعه تجربی اووسیت های زاینوپوس لویس با استفاده از کلاژناز به روش استاندارد جدا گردیدند. روش تغییر سریع جهت ایجاد موتاسیون در انتهای کربوکسیل کانال پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه استفاده گردید. crna مربوط این کانال وموتاسیون های s362d, s362a ایجاد شده به اووسیت ها تزریق گردید. پس از سه روز (زمان صفر) به محیط کشت برفلدین a، مهار کننده انتقال پروتئین های ساخته شده به غشاء به مقدار 25 میکرومولار یا اتانول به عنوان حلال برفلدین a اضافه گردید. از تکنیک ثابت نگه داشتن ولتاژ دو الکترود برای اندازه گیری جریا نهای یونی و همچنین پتانسیل غشاء استفاده شد.

نتایج: اووسیت های که کانال های پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه و یا موتاسیون فسفوریله کننده s362d را بیان می کردند در طی دوره انکوبه شدن در محلول برفلدین a کاهش معنی داری در میزان جریان یون پتاسیم و پتانسیل غشاء را نشان دادند. میزان کسر جریان برای کانال های پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه و موتاسیون فسفوریله کننده پس از 48 ساعت انکوبه شدن در برفلدین a برابر با 0.11±0.05 بود که به طور معنی داری با کسر جریان مربوط به موتاسیون دفسفوریله کننده 0.96±0.05 تفاوت داشت.

نتیجه گیری: اسید آمینه سرین جایگاه 362 در قسمت داخلی ناحیه pdz با ایجاد حالت فسفوریله در آندوسیتوز و تعیین تعداد کانال های پتاسیمی نوع 2 قسمت خارجی مدولا کلیه دخالت دارد.