جداسازی لپتوسپیراهای بیماری زا از خون بیماران و تشخیص و تایپینگ آنها به روش pcr-rflp

روش بررسی: در این مطالعه توصیفی، بیماران بستری شده در بخش های اورژانس، داخلی و عفونی بیمارستان رازی رشت که تشخیص بالینی لپتوسپیروز داشتند؛ از ابتدای اردیبهشت تا پایان مرداد 1387 بررسی شدند. کشت های مثبت با روش فنل-کلروفرم مورد استخراج dna قرار گرفتند pcr با استفاده از دو جفت پرایمر b64-ii ,b64-i ,g2 ,g1 انجام شد. محصول pcr حاصل از پرایمرهای  g2 ,g1 با آنزیم ddei و محصول  pcrحاصل از پرایمرهای b64-ii ,b64-i با آنزیم hinf i برش داده شدند و الکتروفورز گردیدند و الگوی باندی آنها با الگوهای مربوط به سویه های استاندارد مقایسه و تعیین هویت شد.

یافته ها: 65 مورد از مجموع 107 نمونه کشت داده شده؛ مثبت گردیدند. 56 نمونه با پرایمرهای g2 ,g1 جواب دادند که به گونه های اینتروگانس و بورگ پترسنی متعلق بودند و 9 مورد نیز با پرایمرهای b64-ii ,b64-i پاسخ دادند که همگی به گونه کیرشنری متعلق بودند.

نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که اکثریت لپتوسپیراها در این منطقه از گونه های اینتروگانس و بورگ پترسنی می باشند. با توجه به مشکلات متعدد در سروتایپینگ لپتوسپیراها، روش pcr-rflp برای تعیین هویت و مطالعه ساختارهای یک جمعیت داخل گونه ای مفید می باشد و استفاده مستقیم از آن برای نمونه های بالینی و تشخیص سریع و تعیین هویت، کاربرد دارد.